簡(jiǎn)要描述:聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA為模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下,將該段DNA擴增至足夠數量,以便進(jìn)行結構和功能分析賽默飛 75003489 PCR 8×8 轉頭 帶螺旋蓋
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賽默飛 75003489 PCR 8×8 轉頭 帶螺旋蓋
聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA為模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下,將該段DNA擴增至足夠數量,以便進(jìn)行結構和功能分析。PCR檢測方法在臨床上快速診斷細菌性傳染病等方面具有極為重要的意義。
PCR原理用于擴增位于兩段已知序列之間的DNA片段,類(lèi)似于天然DNA的復制過(guò)程。以擬擴增的DNA分子為模板,以一對分別與模板5’末端和3’末端互補的寡核苷酸片段為引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留復制的機制沿著(zhù)模板鏈延伸直至完成新的DNA合成,重復這一過(guò)程,即可使目的DNA片段得到擴增。
1、PCR是現在實(shí)驗室常用的技術(shù)手段之一。
2、一般用于病原的檢測,分子機制中各基因的檢測以及遺傳相關(guān)的檢測。
3、感染性疾病PCR在醫學(xué)檢驗學(xué)中最有價(jià)值的應用領(lǐng)域就是對感染性疾病的診斷。
4、理論上,只要樣本有一個(gè)病原體存在,PCR就可以檢測到。
5、一般實(shí)驗室也能檢出10~100基因拷貝,而目前病原體抗原檢測方法一般需要105-7個(gè)病原體才可檢測到。
6、PCR對病原體的檢測解決了免疫學(xué)檢測的“窗口期"問(wèn)題,可判斷疾病是否處于隱性或亞臨床狀態(tài)。
7、定量PCR研究資料已表明,病原體數量與感染性疾病病情的輕重程度、傳染性及治療效果均有相關(guān)性。
8、許多研究表明,人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)感染后,潛伏期長(cháng)短和臨床癥狀輕重與血液中的病毒量顯著(zhù)相關(guān);也有研究表明,HIV病毒載量低于一定值時(shí),沒(méi)有傳染性。
9、在乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒定量研究中發(fā)現,病毒的數量與某些藥物的療效相關(guān)。
10、例如,干擾素治療對肝炎病毒高拷貝者不敏感,低拷貝者敏感;而有些藥物則具有顯著(zhù)降低病毒高拷貝的作用。
11、腫瘤癌基因的表達增加和突變,在許多腫瘤早期和良性的階段就可出現。
12、PCR技術(shù)不但能有效的檢測基因的突變,而且能準確檢測癌基因的表達量,可據此進(jìn)行腫瘤早期診斷、分型、分期和預后判斷。
13、幾乎所有慢性骨髓性白血病患者都可檢測到原癌基因易位導致的BCR/ABL融合基因形成,定量PCR技術(shù)可通過(guò)檢測BCR/ABL融合基因的表達確定微量殘余惡性細胞存在的數量,以此作為治療效果和估計復發(fā)的危險性的依據。
14、一些病毒致癌作用也與病毒載量有關(guān),EB病毒載量的FQ-PCR檢測結果已被用于鼻咽癌早期發(fā)現和隨訪(fǎng)。
15、遺傳病PCR技術(shù)首ci臨床應用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開(kāi)始的。
16、基因的突變和缺失均會(huì )引起各種珠蛋白的表達不平衡,用FQ-PCR檢測各種珠蛋白基因表達差異,是地中海貧血診斷的有效手段。
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